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膠體金的檢測原理介紹

更新時(shí)間:2017-11-24      點(diǎn)擊次數(shù):7769
膠體金是一種常用的標(biāo)記技術(shù),是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù),有其*的優(yōu)點(diǎn)。近年已在各種生物學(xué)研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術(shù)幾乎都使用其標(biāo)記。同時(shí)在流式、電鏡、免疫、分子生物學(xué)以至生物芯片中都可能例用到。
 
膠體金是氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,金離子還原后聚合成的一定大小的金顆粒,它由一個(gè)基礎(chǔ)的晶核(11個(gè)金原子形成的二十面體)和包圍在外的雙離子層構(gòu)成(內(nèi)層為負(fù)離子層AuCl2-,外層是帶正電荷的H+)。由于靜電作用,金顆粒之間相互排斥而懸浮成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài),形成帶負(fù)電的疏水膠溶液,故稱膠體金。 質(zhì)量差的溶液燒制后,液面有漂浮物,大小不一,形狀各異。膠體金顆粒大小,決定了我們用肉眼觀察到的膠體金溶液顏色,由紅到紫色。
 
膠體金一般在弱堿環(huán)境下帶負(fù)電荷,會(huì)與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)形成牢固的結(jié)合,一般稱這種結(jié)合叫靜電結(jié)合,所以不影響蛋白質(zhì)的生物特性。除了與蛋白質(zhì)結(jié)合以外,它還可以與許多其它生物大分子結(jié)合,如SPA、PHA、ConA等。根據(jù)膠體金的一些物理性狀,如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應(yīng),加上結(jié)合物的免疫和生物學(xué)特性,從而使膠體金廣泛地應(yīng)用于免疫學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域。 
 
膠體金具有很高的動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性,在穩(wěn)定因素不受破壞時(shí)自身凝聚極慢,可放置數(shù)年不發(fā)生凝聚。影響穩(wěn)定的因素主要有電解質(zhì)、溶膠濃度、溫度、非電解質(zhì)等。金溶膠必須有少量電解質(zhì)作穩(wěn)定劑,但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質(zhì)能剝?nèi)ツz粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質(zhì)促使溶膠凝聚,但一定量的高分子物質(zhì)反而可增加溶膠穩(wěn)定性,如蛋白質(zhì)、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的穩(wěn)定效果。
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