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解讀|ELISA 法快速檢測食品中重金屬含量的研究進展

更新時間:2018-01-08      點擊次數:2801

比重大于 4.5 的金屬被稱為重金屬,如鉻(Cr)、鉛(Pb)、鎘(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、銅(Cu)等,它們往往在動物和植物體內不斷積聚,再經由食物鏈富集,zui后進入人體并在人體內與蛋白質及酶等發生強烈的相互作用,使它們失去活性,從而危害人體健康。我國食品中重金屬超標問題也時有發生,水產品、海產品、水果、蔬菜以及糧食等均存在重金屬超標的現象。

 

目前,重金屬檢測已成為食品安全檢測的一項重要內容。傳統的重金屬檢測方法有很多,例如原子吸收分光光度法(AAS)、液相色譜法(HPLC)、原子熒光分光光度法(AFS)、電感藕合等離子體法(ICP)等。電感藕合等離子體法又分為電感藕合等離子質譜法(ICP-MS)和電感藕合等離子原子發射光譜法(ICP-AES)。經過多年的發展,傳統的重金屬檢測方法已日趨成熟,例如HPLC 靈敏度高、操作簡便、重復性好且可同時測定多種元素。但該方法檢測費用高,流動相消耗大且多數有毒,并且可供使用的結合劑有限,給該方法帶來了很多的局限性。這些傳統的重金屬檢測方法均有各自的優點,也存在一些難以解決的問題:如有的方法儀器設備昂貴、專業技術要求高、難以應用于現場實時快速檢測等。

 

自從酶聯免疫法(Enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)被Engvall 等建立以來,廣泛用于食品、醫學檢測,近年來許多學者研究用于重金屬的檢測,與傳統檢測技術相比,有操作簡便、特異性強、靈敏度高、適用于現場檢測等優點,因而 ELISA 法在重金屬的檢測中得以快速發展。

 

隨著酶聯免疫檢測技術在重金屬檢測上的快速發展,ELISA 試劑盒的應用解決了傳統檢測技術的一些弊端,現已成為了一種快速、簡便和可靠的檢測手段。ELISA 檢測方法只能在液相環境中進行,即只能檢測離子態重金屬,而金屬往往以結合態存在于樣品中,因此需要通過前處理使樣品中待測的金屬離子釋放到液相檢測環境中,同時還可除去干擾因子避免對后續檢測結果的影響。因此,建立一套快速、、環保且適用于ELISA 法檢測重金屬含量的樣品前處理的方法具有重要的意義。目前適用于ELISA 法快速檢測食品中重金屬含量的樣品前處理方法主要有:濕式消化法、微波消解法、浸提法等。

 

ELISA法檢測重金屬常用方法

1

間接競爭法

間接競爭法的原理是待檢測樣品中的競爭物和重金屬*抗原共同競爭結合單克隆抗體相同表位,通過酶標二抗孵育,底物顯色后可通過標準曲線得到待檢測樣品中的重金屬離子的濃度。該方法是zui早使用的免疫學檢測方法,該方法比較成熟和完善,也是目前應用zui多的方法。隨著研究的深入,ELISA 法檢測重金屬樣品靈敏度已經*可以達到傳統的技術的水平。

 

2

直接競爭法

直接競爭法的原理與間接競爭法類似,相對于間接競爭法來說,無需加二抗,一方面降低了實驗成本、簡化了操作步驟;另一方面其檢測靈敏度高、特異性強。但由于起步相對較晚,應用沒有間接競爭法普遍。Liu [38]等采用直接競爭ELISA法檢測農產品中Cd2+,IC50值為2.30μg/L,檢測限為0.2 μg/L,并表現出高特異性,并且結果與GFAAS法的檢測結果的符合率高達99%,加之其簡便性和經濟性,*適用于農產品中重金屬的檢測。

 

傳統重金屬檢測方法比較成熟,靈敏度高,但需要專業技術人員以及儀器設備較大、較笨重且成本高。ELISA 法檢測重金屬存在檢測過程操作簡便、特異性強、靈敏度高且適用于現場檢測等優點,是一種具有特異性強和靈敏度高的檢測方法。隨著研究的深入,ELISA法檢測重金屬樣品也日臻成熟,靈敏度多已達到ng至pg級水平,加之ELISA法檢測重金屬的方便性,將在很多方面得到更廣泛的應用。

 

【參考文獻】

茍珍瓊,蘭洋,鄭韻,等. ELISA 法快速檢測食品中重金屬含量的研究進展[J]. 食品與發酵工業,2017-9-19.

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