Elisa測定結果的誤差分類與來源
陳青(北京維德維康生物技術有限公司)
誤差:elisa測定結果與真實數值之間的差異叫誤差。誤差可分為隨機誤差和系統誤差兩大類。
隨機誤差:指某實驗室不同測定方法之間或同一次測定不同樣本(但樣本為同一類)之間因隨機因素引起的實驗誤差,這類誤差可以通過建立標準曲線控制在一定范圍內。
系統誤差:指同一實驗室使用不同方法或不同實驗室使用同樣方法之間的誤差。這類誤差常常引起一系列甚至整批樣本的測量值偏向一側,故又稱為偏差。在elisa中,系統誤差是可以而且應該通過努力降低到可忽略的程度。
Elisa測定結果的誤差來源有兩個方面:
實驗誤差:即在酶促反應和免疫反應兩個過程中所出現的誤差。如移液誤差(加樣誤差)、稀釋誤差(標準品稀釋)、回歸誤差、錯分誤差(分離不*引起)等;
系統誤差:
?因反應時間不正常、反應條件不穩定、分離過程不恒定所致的誤差和技術誤差(樣本和標準品加樣使用不同的加樣器)等。
‚計數誤差,包括用酶標儀測量反應液OD值過程中所引起的誤差(如光線、載體板質量等對測量的影響,酶標儀探頭被污染等)和儀器本身的誤差。
ƒ計算結果時標準曲線的擬合程度和計算本身引起的誤差(如回歸系數計算誤差、濃度在標準曲線兩端樣本的計算所引起的誤差等)。
由上述內容可知elisa測定的結果受多方面因素的影響極易出現誤差,尤其elisa是微量分析,又使用了生物試劑,如抗原、抗體、酶標記物等。*生物制品是極不穩定的,不同批次的生物制品質量會有差異,同一批生物制品在不同保存時間和不同保存條件下的質量也是不同的(即生物制品的性質具有可變性和易變形,易受各種因素如:環境、溫度、時間等影響)。如果elisa試劑盒生產廠家沒有完整的質量控制標準和方法,那么所生產的產品在檢測樣本時就極有可能得出錯誤的結果。因此選擇有嚴格質量控制標準的elisa生產廠家的產品是十分有必要的。
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