ELISA試劑盒試驗之前要做哪些準備工作?
更新時間:2017-08-23 點擊次數:1482
ELISA試劑盒又叫酶聯免疫試劑盒,自從60-70年代問世以來,得到*科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
在使用ELISA試劑盒進行試驗之前要做哪些準備工作呢?
1. 仔細閱讀說明書,確定試劑盒在有效期內。
2. 按說明書確定所有試劑是否齊全,完整的Sunny ELISA試劑盒包含預包被酶標板,檢測抗體、鏈霉親合素標記的HRP、標準品、標準品稀釋液、TMB顯色液、終止液、洗液等10個組分。另外要確認試劑盒以外的材料是否齊全,如酶標儀、移液器及槍頭、加樣槽、離心管、量筒、蒸餾水、稀釋用聚丙烯試管等。
3. 實驗前,將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置半個小時,以讓試劑恢復到室溫。
4. 將10×的檢測緩沖液(Assay Buffer)稀釋到1×,吸取10X濃縮Assay buffer 5mL至50mL離心管,加蒸餾水至 50Ml,震蕩混勻備用。1×Assay buffer主要用于檢測抗體、HRP等濃縮液的稀釋。
5. 將20×的洗滌液稀釋到1×,吸取20X洗液50mL至1L量筒,加蒸餾水至1000Ml,混勻,轉移至干凈容器內備用,洗滌液用于實驗中的洗滌步驟。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正常現象,可用37℃水浴微加熱使結晶*溶解后再配制洗滌液,(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。